BIOLOGÍA MOLECULAR.: ADN RECOMBINANTE Y TRANSGENICOS.

RECOMBINACIÒN DE ÀCIDOS NUCLÈICOS EN LA NATURALEZA

El ADN recombinante contiene genes o partes de genes de diferentes organismos, en muchos casos de distintas especies. El ADN se recombina de forma natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral. Las bacterias sufren varios tipos de recombinación que hacen posible la transferencia de genes entre especies no afines, por medio de un proceso conocido como transformación el cual permite a las bacterias capturar ADN libre del ambiente. También puede haber transformación cuando las bacterias capturan diminutas moléculas circulares de ADN llamadas plásmidos. Cuando la bacteria muere, libera estos plásmidos en el ambiente, donde pueden ser capturados por bacterias de la misma especie o de otra diferente.

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

Los métodos de determinación del perfil del genotipo F8 están bien establecidos, lo que facilita la identificación de los tipos de mutación asociados con la enfermedad, así como las interacciones moleculares de HA. Sin embargo, se sabe poco sobre la relación entre los genotipos F8 y sus fenotipos expresados. Además, no está claro cómo las mutaciones específicas de F8 influyen en la actividad del FVIII y / o las interacciones proteína-proteína. Para comprender mejor estos mecanismos, es útil generar polipéptidos correspondientes a dominios de FVIII que sean detectables por anticuerpos específicos de dominio. Por lo tanto, se ha clonado cada dominio de F8 a partir de hepatocitos Hep3B y produjeron proteínas recombinantes específicas del dominio de FVIII.

EJEMPLO DE TRANSGÉNICO ANIMAL

Los métodos de fabricación actuales para el factor VIII humano recombinante (rFVIII) en cultivos de células de mamíferos son ineficaces, lo que dificulta la producción de cantidades suficientes para el tratamiento asequible y mundial de la hemofilia A. Sin embargo, las glándulas mamarias transgénicas han expresado rFVIII en niveles muy altos de ratones, conejos, ovejas y cerdos. Se crearon ratones transgénicos con un gen de FVIII específico mamario (226 / N6), en donde la actividad hemostática del 226 / N6 se ha enriquecido con inmunoafinidad, lo cual fue estudiado in vivo mediante infusión en ratones knockout para la hemofilia A.