PRUEBA DE REACCIÓN EN CADENA DE POLIMERASA EN HEMOFILIA A.

TEMA: PCR inversa para realizar haplotipos a larga distancia: principales aplicaciones para mejorar el diagnóstico genético preimplantacional en hemofilia.

OBJETIVO: Identificar las multialelas de la repetición en tándem corta (STR) F8 Int21,  en el F8- intrón 21, como un marcador de ADN sustituto para el F8-intron 22 inversión (Inv22), la    zona activa causante de la hemofilia A.

MUESTRA: Sangre periférica.                                     

ÁCIDO NUCLEICO: ADN genómico.    

GEN: Gen del factor VIII.

TIPO DE PCR: Amplificación de PCR inversa.

DESNATURALIZACIÓN: 94°C durante 3 min.

HIBRIDACIÓN: 52°C durante 1 min.

ELONGACION: 72°C  durante 6 min.

VISUALIZACION: Electroforesis en gel de agarosa al 1% teñida con bromuro de etidio.

Referencias Bibliográficas: 

https://www.nature.com/articles/s41431-018-0334-9?fbclid=IwAR28BD-JHoARzPaaJlXl7IGJ7N64y0YsBVn1mFeU9isfLAuZMAba9AaDzqE